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課程培訓(xùn)
DESeq2 基因差異表達(dá)分析與統(tǒng)計(jì)建模培訓(xùn)課程

DESeq2 基因差異表達(dá)分析與統(tǒng)計(jì)建模培訓(xùn)課程

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  • 培訓(xùn)對(duì)象:轉(zhuǎn)錄組研究人員、生物統(tǒng)計(jì)人員、需要掌握基于計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)的差異表達(dá)分析方法的科研人員。

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  • 培訓(xùn)目標(biāo)

    1. 理解DESeq2基于負(fù)二項(xiàng)分布的統(tǒng)計(jì)模型原理,掌握輸入數(shù)據(jù)的準(zhǔn)備與預(yù)處理方法。

    2. 熟練使用DESeq2進(jìn)行基因水平的差異表達(dá)分析,正確解讀分析結(jié)果與統(tǒng)計(jì)指標(biāo)。

    3. 掌握數(shù)據(jù)可視化與結(jié)果解讀技巧,能夠?qū)⒉町惢蛄斜碛糜谙掠喂δ芨患治觥?/span>

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  • 培訓(xùn)內(nèi)容介紹

    1. RNA-seq計(jì)數(shù)數(shù)據(jù):理解基因表達(dá)計(jì)數(shù)矩陣的產(chǎn)生方式(HTSeq-count、featureCounts、Kallisto)

    2. DESeq2統(tǒng)計(jì)原理:了解負(fù)二項(xiàng)分布模型、均值-方差關(guān)系、倍數(shù)收縮等核心統(tǒng)計(jì)思想

    3. R環(huán)境與數(shù)據(jù)準(zhǔn)備:安裝DESeq2包,準(zhǔn)備計(jì)數(shù)矩陣和樣本信息表,導(dǎo)入R環(huán)境。

    4. DESeq2對(duì)象構(gòu)建:使用DESeqDataSetFromMatrix構(gòu)建數(shù)據(jù)對(duì)象,指定實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)公式。

    5. 差異表達(dá)分析流程:運(yùn)行DESeq函數(shù)完成歸一化、離散度估計(jì)和統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)的全流程。

    6. 結(jié)果提取與解讀:使用results函數(shù)提取比較結(jié)果,理解baseMean、log2FoldChange、pvalue、padj的含義。

    7. 數(shù)據(jù)歸一化探索:了解size factor的計(jì)算方式,比較原始計(jì)數(shù)與歸一化計(jì)數(shù)的差異。

    8. 可視化診斷:繪制MA圖、火山圖、PCA圖、樣本距離熱圖,評(píng)估數(shù)據(jù)質(zhì)量和分析效果。

    9. 多重假設(shè)檢驗(yàn)校正:理解padj的計(jì)算方式(BH方法),掌握顯著基因篩選標(biāo)準(zhǔn)。

    10. 多因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):處理包含批次效應(yīng)、配對(duì)樣本等復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的差異分析。

    11. 結(jié)果導(dǎo)出與注釋:將顯著差異基因列表導(dǎo)出,添加基因符號(hào)和功能注釋信息。

    12. 綜合實(shí)戰(zhàn)演練:以真實(shí)RNA-seq計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)為例,完成DESeq2全流程分析及可視化。





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專家力量:
中國(guó)科學(xué)院軟件研究所,計(jì)算研究所高級(jí)研究人員
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